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改進(jìn)飽和鹽水漂浮法診斷兔球蟲(chóng)病

84農(nóng)業(yè)網(wǎng)   時(shí)間:2018-03-15    作者:佚名    來(lái)源:網(wǎng)絡(luò)整理

球蟲(chóng)病是家兔常見(jiàn)的寄生性原蟲(chóng)病,主要由艾美爾屬球蟲(chóng)所引起的,各種年齡的家兔都有易感性,4~5月齡幼兔感染率可達(dá)100%,球蟲(chóng)病導(dǎo)致幼兔生長(zhǎng)發(fā)育受阻,甚至大批死亡,本病常呈地方性流行。由于球蟲(chóng)的種類(lèi)和寄生部位的不同,可以分為肝球蟲(chóng)病和腸球蟲(chóng)。坏旌细腥咀顬槌R(jiàn)。據(jù)我國(guó)學(xué)者報(bào)道,全國(guó)已發(fā)現(xiàn)16種兔艾美爾球蟲(chóng)。從1997~2005年中,我們?cè)谂R床上數(shù)百次改進(jìn)飽和鹽水浮集法,盡量縮短診斷時(shí)間、提高檢出率,在256例球蟲(chóng)病檢測(cè)中,診斷準(zhǔn)確率達(dá)90%以上,為養(yǎng)兔業(yè)提供了很好的技術(shù)方法。

1材料和方法

1.1制備飽和食鹽溶液

將蒸餾水邊加熱邊加入NaCI,直至不再溶解生成沉淀為止(1000mL水中約加入NaCl370g)。用濾紙(型號(hào)為中速202)過(guò)濾,冷卻(NaCI略有析出)后使用。

1.2取糞便

將剖檢的病兔尸體平放,提出胃、腸部分平放在方盤(pán)內(nèi),取十二直腸或盲腸內(nèi)的糞便(糞便內(nèi)最好略帶血且不要過(guò)稀)5g放入容量為50~60mL的寬口瓶或量筒中備用。

1.3卵囊富集方法

1.3.1在盛有糞便的寬口瓶或量筒中加入少量的飽和食鹽溶液(一般為容器容量的1/2為宜),用玻璃棒壓碎且攪拌混勻,攪拌時(shí)注意不要濺出。攪拌好后將寬口瓶或量筒靜置40min左右。

1.3.2用四層紗布將靜置好的液體過(guò)濾入另一寬口瓶或量筒中,棄去糞渣,繼續(xù)注入飽和食鹽溶液至瓶口,要使瓶口液面凸起,但又不會(huì)溢出,靜置1.5小時(shí)左右。

1.3.3用層紗布將靜置好的液體過(guò)濾圖另一寬瓶口上,使載玻片底面與瓶?jī)?nèi)的液面相接觸,勿使有空隙;然后將載玻片輕而快地自瓶口向上提起,同時(shí)迅速翻轉(zhuǎn),使液面向上,勿使液體流落:取一蓋玻片,均勻地壓在載玻片上,使蓋玻片與液體充分接觸,不要出現(xiàn)氣泡。

2鏡檢

將載玻片置于10X10倍的光鏡下,調(diào)整顯微鏡,使視野清晰,并且光亮不必太強(qiáng)。調(diào)好視野后,可隨意滑動(dòng)載玻片的位置,仔細(xì)觀察是否有球蟲(chóng)卵囊。顯微鏡下觀察球蟲(chóng)卵囊呈橄欖形,有棗核般大小,卵囊壁有的厚有的薄,一般光滑而均勻一致。由于球蟲(chóng)種類(lèi)不同,所以卵囊的形態(tài)(包括長(zhǎng)卵圓形、長(zhǎng)圓形、卵圓形、梨形、長(zhǎng)橢圓形、寬卵圓形、筒形)和顏色(淡黃、無(wú)色、橙黃、淡綠、淡灰)略有差異。

3討論和小結(jié)

3.1本診斷方法與普通的飽和鹽水漂浮法原理一致,都是采用比卵囊密度大的溶液浸泡糞便,使卵囊上浮于液體表層。但是本診斷方法更為簡(jiǎn)單。對(duì)于實(shí)驗(yàn)條件、實(shí)驗(yàn)設(shè)備以及實(shí)驗(yàn)操作的要求也不高,并且只要實(shí)驗(yàn)操作無(wú)誤,發(fā)現(xiàn)卵囊的機(jī)會(huì)很高。非常適合基層獸醫(yī)人員診斷兔球蟲(chóng)病。

3.2在配制飽和食鹽溶液時(shí),要注意食鹽量不要加的過(guò)多,只要按照比例加入,不再析出即可。如果鹽量過(guò)多,在第二次靜置時(shí)就會(huì)析出大量食鹽結(jié)晶,影響觸片效果。

3.3在用載玻片接觸液面時(shí),用力不要過(guò)大,并且要一次成功,因?yàn)殪o置后所有的球蟲(chóng)卵囊都會(huì)漂浮在液面上,經(jīng)過(guò)一次接觸,球蟲(chóng)卵囊大部分已經(jīng)粘附在載玻片上,液面已所剩無(wú)幾。

3.4在向載玻片上壓蓋玻片時(shí),用力要輕,要從載玻片的一側(cè)傾斜著壓向另一側(cè),此時(shí)動(dòng)作要迅速,一定要使蓋玻片和載玻片間沒(méi)有氣泡。如果出現(xiàn)氣泡,若觀察不仔細(xì)有時(shí)會(huì)誤將氣泡視作球蟲(chóng)卵囊,影響鏡檢結(jié)果。

3.5在使用光鏡觀察時(shí),光亮的強(qiáng)度一定要小,要使鏡下形成一個(gè)暗視野。因?yàn)榍蛳x(chóng)卵囊并不是一個(gè)實(shí)心的橢圓體,而是空泡狀顏色略暗的橢圓體,若光亮太強(qiáng),有時(shí)反而觀察不到球蟲(chóng)卵囊。

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